3 检测
扩展基因代码方便对比
地点:生物防护二级实验室(PCR实验室)
试管中的基因片段随后将送进PCR实验室。
李晓丹说,PCR仪是核酸检测病毒的关键设备。最近几天,他们针对甲型H1N1流感开发的检测试剂盒,就将在这个环节发挥主要作用。
实验人员将试管内的一组基因片段放入检测试剂配置的反应液中,再置于PCR仪下,大概两个半小时左右,每个基因片段都被放大,生成了大小不一的核酸扩展物CDNA(基因片段扩展物)。
同时,另一部分通过反应液,被分装在PCR小试管内的核酸RNA(核糖核酸),则可以在特制模板中,通过与目标病毒基因片段的定时定量比对,由实验人员读出结果:是否为甲型H1N1流感病毒。
李晓丹说,为了确保检测结果的准确无误差,这个定时定量PCR检测结果,只作为整个甲型H1N1流感病毒追索结论的一个参考。
4 确诊
电泳胶内筛显病毒“原形”
地点:生物防护一级实验室(综合实验室)
装有不同基因片段扩展物的微小试管被送进综合实验室,这里的关键设备是盛满了琼脂糖凝胶、两头插着正负电极的矩形电泳检测仪。
利用移液器,实验人员将试管中微量的无色透明液体染色后,再放入充了电的胶“池”。
在电压牵引推动下,胶池的表面开始密集冒起小气泡,“那是病毒的基因扩展物在向另一个方向走,个头大的产物走得慢,越是个头小的产物走得越快。”李晓丹说,琼脂糖凝胶电泳仪就像一面筛子,把病毒中每个基因片段都以特定的“大”、“小”影像显现出来。
当然,上述景象人的肉眼无法看到。实验人员让“胶池”充电40分钟,确保所有的扩展物都“运动”起来后,将“胶池”放进另一个特制的方形“铁柜”中,这其实是一部紫外线下工作的“照相机”———凝胶成像仪。
成像仪内,紫外线灯发光,照射在凝胶上,然后对胶中染色发光的扩展物自动拍照,并输出在连接的电脑屏幕上。
李晓丹介绍,电脑中还能同时调出甲型H1N1流感病毒基因序列图,在同一个位置上,受检病毒的数个基因片段扩展物大小与参照物完全相合,就能够最终判断,标本送检患者感染了甲型H1N1流感病毒。
反之,排除感染可能。
李晓丹说,从病毒标本送至实验室到最终检测出结果,约需4—6小时。
甲型H1N1病毒检测程序
医生对疑似患者的鼻液或喉液取样
送入流感网络实验室
提取多个基因片段,对逐个基因片段进行扩展(放大)
扩展物入胶染色,在紫外线灯下发光成像
与电脑中储存的目标病毒基因片段对比,同一位置上,大小是否完全一致
若一致则能够最终判断,标本送检患者感染了甲型H1N1流感病毒
本组稿件采写/本报记者 魏铭言 本组稿件摄影/本报记者 王申
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